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淀粉的含量测定

2018-11-15

食用玉米淀粉含量测定

第一法 酶水解法

  一、目的与要求:

  1、明确与掌握各类食品中淀粉含量的原理及测定方法。

  2、掌握用酶水解法和酸水解法测定淀粉的方法。

  二、原理

  样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用淀粉酶水解成双糖,再用盐酸将双糖水解成单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。

  三,试剂:

  1、0.5%淀粉酶溶液:称取淀粉酶0.5克,加100毫升水溶解,数滴甲苯或三氯甲烷,防止长霉,贮于冰箱中。

  2、碘溶液:称取3.6克碘化钾溶于20毫升水中,加入1.3克碘,溶解后加水稀释至100毫升。

  3、乙醚

  4、85%乙醇

  5、6N盐酸:量取50毫升盐酸加水稀释至100毫升。

  6、甲基红指示液:0.1%乙醇溶液。

  7、20%氢氧化钠溶液。

  8、碱性酒石酸铜甲液:称取34.639克硫酸铜(CuS04·5H2O)。加适量水溶解,加0.5毫升硫酸,再加水稀释至500毫升,用精制石棉过滤。

  9、碱性酒石酸铜乙液:称取173克酒石酸钾钠与50克氢氧化钠,加适量水溶解,并稀释至500毫升,用精制石棉过滤,贮存于橡胶塞玻璃瓶内。 

  10、0.1000N高锰酸钾标准溶液。

  11、硫酸铁溶液:称取50克硫酸铁,加入200毫升水溶解后,人100毫升硫酸,冷后加水稀释至1000毫升。 

  四、操作方法: 

  1、样品处理:

  称取2-5克样品,置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪,再用约100毫升85%乙醇洗去可溶性糖类,将残留物移入250毫升烧杯内,并用50毫升水洗滤纸及漏斗,洗液并入烧杯内,将烧杯置沸水浴上加热15分钟,使淀粉糊化,放冷至60℃以下,加20毫升淀粉酶溶液,在55-60℃保温1小时,并时时搅拌。然后取1滴此液加1滴溶液,应不显现蓝色,若显蓝色,再加热糊化并加20毫升淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显蓝色为止。加热至沸,冷后移入250毫升容量瓶中,并加水至刻度,混匀,过滤,弃去初滤液。取50毫升滤液,置于250毫升锥形瓶中,并加水至刻度,沸水浴中回流1小时,冷后加2滴甲基红指示液,用20%氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100毫升容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并人100毫升容量瓶中,加水至刻度,混匀备用。

  B、测定:

  吸取50毫升处理后的样品溶液,于400毫升烧杯内,加入25毫升碱性酒石酸铜甲液及25毫升乙液,于烧杯上盖一表面皿,加热,控制,在4分钟内沸腾,再准确煮沸2分钟,趁热用铺好石棉的古氏坩埚或c4垂融坩埚抽滤,并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀,至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫升烧杯中,加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水,用玻棒搅拌使氧化亚铜完全溶解,以0.1000N高锰酸钾标准溶液滴定至微红色为终点。

  同时量取50毫升水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液,按同一方法

  做试剂空白实验。

  计算:X1=((A1-A2)×0.9)/( m1×50/250×V1/100×1000)×100

  X1:样品中淀粉的含量,%;

  A1:测定用样品中还原糖的含量,mg;

  A2:试剂空白中还原糖的含量,mg;

  0.9:还原糖(以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数;

  m1:称取样品质量,g;

  V1:测定用样品处理液的体积,毫升(m1)。

  第二法 酸水解法

  一、原理:

  样品经除去脂肪及可溶性糖类后,其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖,然后按还原糖测定,并折算成淀粉。

  二、试剂:

  1、乙醚;

  2、85%乙醇溶液;

  3、6N盐酸溶液;

  4、40%氢氧化钠溶液;

  5、10%氢氧化钠溶液;

  6、甲基红指示液:0.2%乙醇溶液

  7、精密PH试纸

  8、20%乙酸铅溶液

  9、10%硫酸钠溶液

  10、乙醚

  11、碱性酒石酸铜甲液。 (配制见前)

  12、碱性酒石酸铜乙液; (配制见前)

  13、硫酸铁; (配制见前)

  14、0.1000N高锰酸钾标液

  三、仪器:

  1、水浴锅

  2、高速组织捣碎机:1200r/min

  3、皂化装置并附250毫升锥形瓶。

  四、操作方法:

  1、 样品处理

  A、粮食,豆类、糕点、饼干等较干燥的样品,称取2.0-5.0克磨碎过40目筛的样品,置于放有慢速滤纸的漏斗中,用30毫升乙醚分三次洗去样品中的脂肪,弃去乙醚。再用150毫升85%乙醇溶液分数次洗涤残渣,除去可溶性糖类物质。并滤干乙醇溶液,以100毫升水洗涤漏斗中残渣并转移至250毫升锥形瓶中,加入30毫升6N盐酸,接好冷凝管,置沸水浴中回流2小时。回流完毕后,立即置流水中冷却。待样品水解液冷却后,加入2滴甲基红指示液,先以40%氢氧化钠溶液调至黄色,再以6N盐酸校正至水解液刚变红色为宜。若水解液颜色较深,可用精密PH试纸测试,使样品水解液的PH约为7。然后加20毫升20%乙酸铅溶液,摇匀,放置10分钟。再加20毫升10%硫酸钠溶液,以除去过多的铅。摇匀后将全部溶液及残渣转入500毫升容量瓶中,用水洗涤锥形瓶,洗液合并于容量瓶中,加水稀释至刻度。过滤,弃去初滤液20毫升,滤液供测定用。

  B、蔬菜、水果、各种粮豆含水熟食制品:按1:1加水在组织捣碎机中捣成匀浆(蔬菜、水果需先洗净、晾干、取可食部分)称取5-10克匀浆(液体样品可直接量取),于250毫升锥形瓶中,加30毫升乙醚振摇提取(除去样品中脂肪),用滤纸过滤除去乙醚,再用30毫升乙醚淋洗两次,弃去乙醚。以下按A自“再用150毫升85%乙醇溶液”起依法操作。

  2、测定:

  吸取50毫升处理后的样品溶液,于400毫升烧杯内,加25毫升碱性酒石酸铜甲液及25毫升乙液。于烧杯上盖一表面皿加热,控制在4分钟沸腾再准确煮沸2分钟,趁热用铺好石棉的古氏坩埚或G4垂融坩埚抽滤,并用60℃热水洗涤烧杯及沉淀,至洗液不呈碱性为止。将古氏坩埚或垂融坩埚放回原400毫升烧杯中,加25毫升硫酸铁溶液及25毫升水,用玻棒搅拌使氧化铜完全溶解,以0.1000N高锰酸钾标液滴定至微红色为终点。

  同时吸取50毫升水,加与测样品时相同量的碱性酒石酸铜甲乙液、硫

  酸铁溶液及水,按同一方法做试剂空白试验。

  计算: x2=((A3-A4)×0.9)/( M2×V2/500×100)------------------------×100

  




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